Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401641

Übersicht

CHRNB2 kodiert die β2‑Untereinheit neuronaler nikotinischer Acetylcholinrezeptoren (nAChRs), ligandengesteuerter Kationenkanäle, die sich als heteromere Pentamere zusammen mit α‑Untereinheiten zusammenlagern und so die Membranexzitabilität regulieren. Nach Bindung von Acetylcholin oder Nikotin vermitteln β2‑haltige nAChRs den Einstrom von Na⁺ und Ca²⁺ und koppeln cholinerge Signalübertragung an calciumabhängige Signalwege, die die Neurotransmitterfreisetzung, synaptische Plastizität und die Entwicklung neuronaler Schaltkreise beeinflussen. Die Aktivität von CHRNB2 greift in Prozesse ein, die Belohnung, Aufmerksamkeit und Arousal/Erregungsniveau steuern, indem sie dopaminerge und andere neuromodulatorische Netzwerke moduliert. Genetische und funktionelle Veränderungen in CHRNB2 wurden mit neuropsychiatrischen Phänotypen und einer erhöhten Anfallsneigung in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für mechanistische Studien in neuronalen Modellen unterstreicht.

Das Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CHRNB2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CHRNB2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CHRNB2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CHRNB2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CHRNB2-Exone abzielen, die für die Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CHRNB2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CHRNB2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 HDR-Plasmid (h) und Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CHRNB2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CHRNB2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.