Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
NDRG3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424349-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NDRG3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NDRG3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase NDRG3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ndrg3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NDRG3 Anticorpo (H-11): sc-514561
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NDRG3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424349-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NDRG3 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-424349-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Ndrg3 de camundongo codifica a NDRG3, um membro da família NDRG implicado na adaptação ao estresse celular, na regulação metabólica e em programas de diferenciação. A NDRG3 tem sido associada a vias de sinalização relacionadas à hipóxia e a vias responsivas ao lactato, que podem influenciar a sobrevivência celular, a proliferação e os desfechos transcricionais. Em muitos contextos, a atividade da NDRG3 se cruza com processos que controlam o metabolismo mitocondrial, o equilíbrio redox e a expressão gênica do desenvolvimento. A desregulação de redes relacionadas à NDRG3 tem sido associada na literatura a alterações no controle de crescimento e a fenótipos relevantes para doenças, sustentando seu uso como um nó funcional em estudos de vias e mecanismos.
NDRG3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ndrg3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ndrg3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ndrg3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ndrg3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.