NCOAT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-429251

개요

Mgea5는 NCOAT(또는 O‑GlcNAcase로도 알려짐)를 암호화하며, 이는 핵 및 세포질 단백질의 세린과 트레오닌 잔기에 결합된 O‑결합 β‑N‑아세틸글루코사민(O‑GlcNAc)을 제거하는 핵심 효소입니다. NCOAT는 O‑GlcNAc 전달효소(O‑GlcNAc transferase)와 함께 영양 상태 감지와 인산화 의존적 신호전달을 통합하는 동적인 O‑GlcNAc 순환을 조절하여 전사, 세포주기 진행, 단백질 항상성(proteostasis), 스트레스 반응에 영향을 미칩니다. NCOAT의 활성은 전사인자, 키나아제, 세포골격 단백질의 O‑GlcNAc 수준을 조절함으로써 인슐린/AKT 신호, 염색질 조절, 단백질 품질 관리와 같은 경로에 영향을 줍니다. O‑GlcNAc 항상성의 조절 이상은 대사 이상 및 신경퇴행과 연관된 표현형과 연결되어 있어, Mgea5는 신호전달과 후성유전적 조절을 연구하는 마우스 모델에서 유용한 표적으로 여겨집니다.

NCOAT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Mgea5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Mgea5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Mgea5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NCOAT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NCOAT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Mgea5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NCOAT 기능에 중요한 Mgea5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Mgea5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NCOAT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 NCOAT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Mgea5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NCOAT HDR 플라스미드 (m) 및 NCOAT HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Mgea5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Mgea5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.