Plasmide Double Nickase (h) MYBPC3: sc-401409-NIC

MYBPC3 code la protéine C de liaison à la myosine cardiaque (cardiac myosin‑binding protein C), une protéine accessoire des filaments épais du sarcomère qui module le cycle des ponts actine‑myosine et contribue à la stabilisation et à la régulation de la fonction contractile. Grâce à des interactions dépendantes de la phosphorylation avec la myosine et la titine, MYBPC3 aide à ajuster la contractilité sensible au calcium et favorise l’assemblage ordonné ainsi que la maintenance du sarcomère cardiaque. Une expression ou une fonction altérée de MYBPC3 perturbe l’organisation myofibrillaire et la mécanique myocardique, reliant ce gène à des phénotypes de cardiomyopathies héréditaires et à des voies de remodelage cardiaque. En tant que gène structural cardiaque humain, MYBPC3 est largement étudié dans des modèles de biologie du sarcomère, de mécanotransduction et de maturation des cardiomyocytes.

MYBPC3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MYBPC3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MYBPC3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MYBPC3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MYBPC3.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.