Mxi1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403155-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Mxi1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Mxi1 Double Nickase Plasmid (h) e il Mxi1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MXI1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Mxi1 Antibody (MXI1C2a): sc-130627
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Mxi1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403155-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mxi1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403155-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’MXI1 umano codifica Mxi1, un repressore trascrizionale di tipo basic helix–loop–helix leucine zipper (bHLH-LZ) nella rete MYC/MAX/MAD che controbilancia la trascrizione guidata da MYC. Mxi1 eterodimerizza con MAX e recluta complessi corepressori SIN3/HDAC su promotori contenenti E-box, modulando lo stato della cromatina e regolando programmi che controllano la progressione del ciclo cellulare, la differenziazione e l’apoptosi. Attraverso questo antagonismo dell’attività di MYC, MXI1 influenza nodi di segnalazione oncogenica e checkpoint della proliferazione cellulare. Alterazioni della funzione o dell’espressione di MXI1 sono state implicate nella biologia dei tumori e vengono spesso studiate nel contesto della dipendenza da MYC, della specificazione di linea e dei programmi trascrizionali di risposta allo stress.
Mxi1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MXI1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MXI1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MXI1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MXI1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.