Mucin 4/MUC4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431204

Descripción general

Muc4 codifica la mucina 4 (MUC4), una mucina transmembrana de alto peso molecular y fuertemente O‑glicosilada que contribuye a la protección de la superficie epitelial, la hidratación y la lubricación. Gracias a su dominio extracelular extendido y a su localización en la superficie celular, MUC4 influye en las interacciones célula–célula y célula–matriz, modula las propiedades de barrera y puede afectar la señalización próxima a receptores y las vías downstream vinculadas con la proliferación, la adhesión y la migración. En tejidos murinos, la expresión de Muc4 se asocia con epitelios mucosos y programas secretores, integrándose con procesos de glicosilación y tráfico de membrana que dan forma al glucocáliz. La expresión desregulada de mucinas y la glicosilación alterada se estudian con frecuencia en el contexto de la inflamación, la remodelación epitelial y los cambios asociados a tumores en la adhesión y la señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Mucin 4/MUC4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Muc4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Muc4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Muc4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Mucin 4/MUC4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Muc4 para la investigación de la señalización de Mucin 4/MUC4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Muc4 críticos para la función de Mucin 4/MUC4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Muc4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Mucin 4/MUC4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Mucin 4/MUC4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Muc4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Mucin 4/MUC4 (m) y el plásmido HDR Mucin 4/MUC4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Muc4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Muc4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.