MR1 Double Nickase Plasmid (m): sc-420785-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MR1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MR1 Double-Nickase-Plasmid (m) und MR1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Mr1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MR1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-420785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MR1 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-420785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Maus-MR1 (MHC-Klasse-I-verwandtes Protein 1) ist ein nicht-klassisches antigenpräsentierendes Molekül, das kleine, aus Metaboliten abgeleitete Liganden bindet und sie an der Zelloberfläche zur Erkennung durch mucosal-associated invariant T (MAIT)-Zellen präsentiert. Über diese MR1–MAIT-Achse trägt MR1 zur Immunüberwachung und zu schnellen Zytokinantworten an Barrieregeweben bei und verknüpft den zellulären Stoffwechselzustand mit der Aktivierung angeborenen T‑Zell-ähnlicher Antworten. MR1-abhängige Signalwege beeinflussen Entzündungsprogramme und die Wirtsantwort auf mikrobielle Metaboliten, was MR1 für Studien zu Infektionen, mukosaler Immunität und Immunregulation in Modellen entzündlicher Erkrankungen relevant macht. Veränderte MR1-Präsentation und MAIT-Zell-Aktivität werden außerdem in der Tumorimmunologie und bei metabolischer Entzündung untersucht, um zu verstehen, wie die Verfügbarkeit von Liganden die Immunfunktion prägt.
MR1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Mr1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Mr1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Mr1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Mr1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.