MPO/Myeloperoxidase Double Nickase Plasmid (h): sc-400822-NIC

MPO kodiert die Myeloperoxidase, eine hämhaltige Peroxidase, die in azurophilen Granula neutrophiler Granulozyten gespeichert und während der Degranulation sowie der Bildung neutrophiler extrazellulärer Fallen (NETs) freigesetzt wird. MPO katalysiert die Umwandlung von Wasserstoffperoxid und Chlorid zu Hypochlorsäure und verwandten reaktiven Oxidantien und verknüpft damit den von der NADPH-Oxidase abhängigen respiratorischen Burst mit antimikrobieller Effektorchemie und Redox‑Signalgebung. Durch die Oxidation von Lipiden, Proteinen und Nukleinsäuren beeinflusst die MPO‑Aktivität inflammatorische Signalkaskaden, endotheliale Dysfunktion und die Rekrutierung von Immunzellen. Eine veränderte MPO‑Expression oder ‑Aktivität wurde mit einer fehlregulierten angeborenen Immunantwort und Phänotypen oxidativen Stresses in Verbindung gebracht, die für die Biologie entzündlicher und vaskulärer Erkrankungen relevant sind, ebenso wie in Studien zum Tumormikromilieu.

MPO/Myeloperoxidase Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MPO-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MPO abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MPO-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.

Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MPO-Störung.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.