Mfn1/Mitofusin 1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-426545-LAC

Das Mausgen **Mfn1 (Mitofusin 1)** codiert eine dynaminähnliche GTPase, die in der äußeren Mitochondrienmembran lokalisiert ist, die mitochondriale Fusion antreibt und die Morphologie des Organells aufrechterhält. **MFN1** koordiniert mit **MFN2** und **OPA1** die Umgestaltung des mitochondrialen Netzwerks, die Organisation der Cristae und die bioenergetische Effizienz und beeinflusst dadurch die ATP-Produktion und die Homöostase reaktiver Sauerstoffspezies. Durch die Kontrolle der mitochondrialen Dynamik wirkt sich **MFN1** auf Prozesse wie Mitophagie, die Empfindlichkeit gegenüber Apoptose und den Calciumhaushalt an Kontaktstellen zwischen Mitochondrien und ER aus. Ein gestörtes Gleichgewicht zwischen Fusion und Spaltung unter Beteiligung von **MFN1** wurde mit Mechanismen in Verbindung gebracht, die für Neurodegeneration, kardiometabolischen Stress und veränderte Programme des Zellüberlebens in mehreren Krankheitsmodellen relevant sind.

Mfn1/Mitofusin 1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Mfn1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Mfn1/Mitofusin 1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Mfn1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Mfn1/Mitofusin 1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Mfn1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.