METTL11B Double Nickase Plasmid (h): sc-414653-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das METTL11B Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- METTL11B Double-Nickase-Plasmid (h) und METTL11B Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf METTL11B abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
METTL11B Double Nickase Plasmid (h) | sc-414653-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
METTL11B Double Nickase Plasmid (h2) | sc-414653-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
METTL11B kodiert eine mutmaßliche S‑Adenosylmethionin‑abhängige Methyltransferase, die an der Proteinmethylierung und einer darüber hinausgehenden, epigenetikähnlichen Regulation der Proteomfunktion beteiligt sein könnte. Als Mitglied der methyltransferaseähnlichen Enzyme wird METTL11B hinsichtlich potenzieller Rollen bei der Modulation von Proteinstabilität, subzellulärer Lokalisation und Interaktionsnetzwerken untersucht, die Zellwachstum und Stressantworten beeinflussen. Fehlregulierte, mit Methylierung assoziierte Signalwege sind häufig mit veränderten Transkriptionsprogrammen und aberranter Signalübertragung in onkologischen und neuroentwicklungsbezogenen Kontexten verknüpft, was METTL11B zu einem interessanten Gen für mechanistische Studien macht. Laufende funktionelle Annotierungsarbeiten zielen darauf ab, seine Substrate sowie seinen Beitrag zu konservierten, methylierungsabhängigen zellulären Prozessen in menschlichen Zellen zu klären.
METTL11B Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des METTL11B-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von METTL11B abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die METTL11B-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit METTL11B-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.