Lunatic Fringe CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421414

개요

Lfng는 골지체에 위치한 β1,3-N-아세틸글루코사미닐전이효소인 Lunatic Fringe를 암호화하며, NOTCH 수용체의 O-푸코실화된 표피성장인자(EGF) 유사 반복 서열을 변형합니다. Lunatic Fringe는 Notch 수용체–리간드 상호작용을 변화시켜 Notch 신호의 세기와 진동성 동역학을 조절하며, 이는 마우스 발생 과정에서 체절(somite) 분절, 경계 형성, 세포 운명 결정에 관여합니다. Lfng 활성은 분절 시계(segmentation clock) 및 여러 조직 전반에서 전구세포의 유지와 분화를 좌우하는 더 광범위한 Notch 의존성 프로그램과 연관되어 있습니다. LFNG/Notch 조절의 이상은 발생 패터닝 결함과 관련이 있으며, 모델 시스템에서 Notch 경로가 질병 연관 표현형에 기여하는 기전을 연구하기 위한 기계론적 단서를 제공합니다.

Lunatic Fringe CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Lfng 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Lfng 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Lfng의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Lunatic Fringe 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Lunatic Fringe 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Lfng 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Lunatic Fringe 기능에 중요한 Lfng 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Lfng 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Lunatic Fringe CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Lunatic Fringe CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Lfng 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Lunatic Fringe HDR 플라스미드 (m) 및 Lunatic Fringe HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Lfng 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Lfng 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.