Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Lumican Double Nickase Plasmid (h): sc-402001-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Lumican Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Lumican Double-Nickase-Plasmid (h) und Lumican Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf LUM abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Lumican: sc-166871
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Lumican Double Nickase Plasmid (h) | sc-402001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Lumican Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LUM kodiert für Lumican, ein sezerniertes, kleines leucinreiches Proteoglykan der extrazellulären Matrix, das an Kollagenfibrillen bindet und die Fibrillogenese, die Gewebehydratation sowie die stromale Architektur reguliert. Lumican moduliert die Zell‑Matrix‑Signalübertragung und beeinflusst über Interaktionen mit Integrinen sowie über die Verfügbarkeit von Wachstumsfaktoren innerhalb der Matrix Prozesse wie Wundheilung, Zellmigration und Mechanotransduktion. In humanen Geweben ist die LUM-Expression besonders in Kornea, Haut und bindegewebigem Stroma ausgeprägt, wo sie zur Kollagenorganisation und zu matrixbedingten Eigenschaften der Transparenz beiträgt. Dysregulierte Lumican-Spiegel und ein verändertes Remodeling der extrazellulären Matrix wurden mit fibrotischem Umbau, inflammatorischen Mikroumgebungen und Tumor‑Stroma‑Interaktionen in Verbindung gebracht, die für Invasion und die Bildung metastatischer Nischen relevant sind.
Lumican Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des LUM-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von LUM abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die LUM-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit LUM-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.