Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (m) LRP5: sc-421465-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) LRP5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LRP5 Double Nickase (m) et le plasmide LRP5 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Lrp5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LRP5 Antibody (B-9): sc-390267
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) LRP5 | sc-421465-NIC | 20 µg | $410.00 |
Lrp5 code pour la protéine 5 apparentée au récepteur des lipoprotéines de basse densité (LRP5), un co-récepteur transmembranaire à passage unique qui potentialise la signalisation Wnt/β-caténine canonique en formant des complexes induits par le ligand avec les récepteurs Frizzled. Dans les tissus murins, LRP5 contribue à l’activité des ostéoblastes, à la régulation de la masse osseuse et à l’homéostasie métabolique, et peut influencer les programmes de prolifération et de différenciation cellulaires via une transcription dépendante de la β-caténine. LRP5 interagit également avec des modulateurs extracellulaires tels que DKK et la sclérostine, et coordonne la sortie de la voie au cours du développement et du remodelage tissulaire. Une signalisation Lrp5 dérégulée est largement utilisée pour modéliser des mécanismes pertinents pour les phénotypes squelettiques et les modifications de la physiologie tissulaire induites par Wnt.
LRP5 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Lrp5 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Lrp5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Lrp5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Lrp5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.