LOXL2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401021-LAC

LOXL2 (Lysyl-Oxidase-like 2) ist eine kupferabhängige Aminoxidase, die die oxidative Desaminierung von Lysinresten in Kollagen und Elastin katalysiert und dadurch kovalente Quervernetzungen sowie das Remodeling der extrazellulären Matrix fördert. Über die Regulation der Matrixsteifigkeit und der Zell–Matrix-Interaktionen beeinflusst LOXL2 Adhäsion, Migration, Programme der epithelial–mesenchymalen Transition und die Aktivierung von Fibroblasten und ist dabei in die TGF-β/SMAD-Signalgebung sowie mechanotransduktive Signalwege wie FAK/SRC und YAP/TAZ eingebunden. Intrazelluläres LOXL2 wurde zudem mit chromatinassoziierten Funktionen in Verbindung gebracht, die Transkriptionszustände modulieren, die für die zelluläre Plastizität relevant sind. Eine dysregulierte LOXL2-Expression ist mit pathologischer Fibrose und dem Remodeling des Tumormikromilieus assoziiert, was LOXL2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung ECM-getriebener Signalgebung und invasiver Phänotypen in humanen Zellmodellen macht.

LOXL2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente LOXL2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

LOXL2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der LOXL2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen LOXL2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen LOXL2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.