Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO LHX4 (m): sc-421427
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- LHX4 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique LHX4, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LHX4 Antibody (E-10): sc-374562
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO LHX4 (m) | sc-421427 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Lhx4 code la protéine LIM homeobox 4 (LHX4), un facteur de transcription qui se lie à l’ADN via un homéodomaine et coordonne des programmes d’expression génique essentiels à la mise en place des axes embryonnaires et à l’organogenèse. Au cours du développement de la souris, LHX4 contribue à la spécification et à la différenciation des lignages de l’hypophyse antérieure, ainsi qu’à des processus plus larges du développement neuronal, en s’intégrant à des cofacteurs à domaine LIM et à des réseaux transcriptionnels de type homeobox. Son activité influence les décisions de destinée cellulaire, l’engagement de lignée et la régulation transcriptionnelle dépendante des morphogènes lors de la formation des tissus. La dérégulation des voies de développement associées à LHX4 est pertinente pour la recherche sur les phénotypes hypophysaires et neurodéveloppementaux, où une altération du dosage de ce facteur de transcription peut perturber la formation des axes endocriniens et l’établissement des circuits neuronaux.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO LHX4 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Lhx4 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Lhx4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Lhx4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine LHX4.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Lhx4 pour l'étude de la signalisation de LHX4, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Lhx4 essentiels à la fonction de LHX4
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Lhx4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le LHX4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le LHX4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Lhx4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le LHX4 plasmide HDR (m) et le LHX4 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Lhx4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Lhx4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.