Plasmide Double Nickase (h) LBP: sc-402651-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LBP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LBP Double Nickase (h) et le plasmide LBP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LBP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LBP Antibody (4E8): sc-293253
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LBP | sc-402651-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LBP | sc-402651-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La protéine de liaison au lipopolysaccharide (LBP) est une glycoprotéine soluble de la phase aiguë qui se lie au lipopolysaccharide (LPS) bactérien et en facilite le transfert vers CD14 et le complexe récepteur TLR4/MD-2, amplifiant la reconnaissance immunitaire innée des bactéries à Gram négatif. Grâce à cette fonction de présentation du LPS, la LBP contribue à l’activation de NF-κB et des programmes en aval de cytokines inflammatoires, qui modulent le recrutement des leucocytes et les réponses inflammatoires systémiques. L’expression de la LBP est régulée par des signaux inflammatoires et elle est souvent utilisée comme marqueur d’exposition aux endotoxines, ce qui la relie aux études des interactions hôte–microbiote et de l’homéostasie immunitaire. Une activité ou une abondance de LBP dérégulée a été associée à des phénotypes inflammatoires et à une physiopathologie liée aux infections, ce qui en fait une cible pertinente pour des travaux mécanistiques en immunologie et dans des modèles d’inflammation métabolique.
LBP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LBP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LBP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LBP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LBP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.