Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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La/SSB Double Nickase Plasmid (h): sc-416582-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das La/SSB Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- La/SSB Double-Nickase-Plasmid (h) und La/SSB Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SSB abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: La/SSB: sc-80656
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
La/SSB Double Nickase Plasmid (h) | sc-416582-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
La/SSB Double Nickase Plasmid (h2) | sc-416582-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane **SSB**-Gen kodiert das RNA-bindende Phosphoprotein **La/SSB**, einen ubiquitär vorkommenden Faktor, der an Transkripte der RNA-Polymerase III bindet, um entstehende RNAs zu schützen und deren Reifung zu unterstützen. La/SSB ist an der RNA-Qualitätskontrolle beteiligt, indem es Prä-tRNAs, U6-snRNA, 5S-rRNA und andere kleine RNAs stabilisiert, und es trägt unter zellulärem Stress über Interaktionen mit spezifischen mRNAs zur Regulation der Translation bei. Durch diese Funktionen verknüpft SSB den RNA-Stoffwechsel mit Prozessen wie der Ribonukleoprotein-Assemblierung, Stressantworten und der Aufrechterhaltung der Proteostase. Autoantikörper gegen La/SSB werden häufig bei systemischen Autoimmunerkrankungen beobachtet, darunter das Sjögren-Syndrom und der systemische Lupus erythematodes, was es zu einem широко genutzten molekularen Ansatzpunkt macht, um immunassoziierte RNA–Protein-Signalwege zu untersuchen.
La/SSB Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SSB-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SSB abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SSB-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SSB-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.