Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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L-FABP Double Nickase Plasmid (h): sc-401554-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das L-FABP Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- L-FABP Double-Nickase-Plasmid (h) und L-FABP Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf FABP1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: L-FABP: sc-271591
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
L-FABP Double Nickase Plasmid (h) | sc-401554-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
L-FABP Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401554-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FABP1 kodiert das leberspezifische Fettsäure-Bindungsprotein (L-FABP), ein im Zytosol hoch abundant vorkommendes Lipid-Chaperon, das langkettige Fettsäuren, Acyl-CoAs, Gallensäuren und andere hydrophobe Liganden bindet, um den intrazellulären Transport und den Stoffwechsel zu koordinieren. In Hepatozyten und Enterozyten unterstützt L-FABP die Aufnahme von Fettsäuren, die β-Oxidation, die Verarbeitung von Triglyzeriden sowie lipidvermittelte Transkriptionsprogramme, die mit PPAR-Signalwegen und Reaktionen auf oxidativen Stress verknüpft sind. Durch die Beeinflussung von Lipidflüssen und inflammatorischer Signalgebung greift die FABP1-Aktivität in die metabolische Homöostase und das zelluläre Redoxgleichgewicht ein. Eine Fehlregulation der FABP1-Expression oder -Funktion wurde mit veränderter hepatischer Lipidakkumulation und einer erhöhten Anfälligkeit für metabolische Leberphänotypen in Verbindung gebracht, was FABP1 zu einem geeigneten Ziel für mechanistische Studien lipidgetriebener Pathologie macht.
L-FABP Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des FABP1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von FABP1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die FABP1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit FABP1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.