Plasmide Double Nickase (h) K-cadherin: sc-401455-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) K-cadherin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide K-cadherin Double Nickase (h) et le plasmide K-cadherin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CDH6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: K-cadherin Antibody (2B6): sc-59974
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) K-cadherin | sc-401455-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) K-cadherin | sc-401455-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH6 code la K-cadhérine, une molécule d’adhérence cellule–cellule classique dépendante du calcium, qui soutient la cohésion épithéliale et la morphogenèse tissulaire via des interactions homophiles au niveau des jonctions d’adhérence. En se couplant aux caténines et au cytosquelette d’actine, la K-cadhérine contribue à la signalisation dépendante du contact, à la polarité cellulaire et à des programmes de migration coordonnée. L’expression de CDH6 est marquée au cours du développement, notamment dans les tissus rénaux et neuraux, et sa dérégulation a été associée à des états d’adhérence altérés liés à la progression tumorale et à des phénotypes d’invasion. Ces propriétés font de CDH6 une cible utile pour étudier la dynamique des jonctions médiées par les cadhérines, les transitions épithélio-mésenchymateuses et les réseaux de signalisation dépendants de l’adhérence.
K-cadherin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CDH6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CDH6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CDH6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CDH6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.