Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO JIP-1 (h): sc-401634
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- JIP-1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique JIP-1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: JIP-1 Antibody (2J8): sc-53552
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO JIP-1 (h) | sc-401634 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
MAPK8IP1 code pour JIP-1 (JNK-interacting protein 1), une protéine d’échafaudage neuronale qui organise des modules de MAPK en coordonnant des MAP3K, MKK7 et JNK (MAPK8) afin de moduler l’amplitude et la localisation de la signalisation activée par le stress. JIP-1 interagit également avec la machinerie de transport axonal et contribue au trafic polarisé ainsi qu’à la croissance des neurites, reliant la transduction du signal à la dynamique du cytosquelette et au déplacement des cargaisons. En modulant des programmes transcriptionnels et apoptotiques dépendants de JNK, MAPK8IP1 a été étudié dans des contextes de neurodégénérescence, de réponses neuronales aux lésions et de voies de stress métabolique. Un échafaudage JIP-1 dérégulé peut modifier la spécificité des kinases et l’expression génique en aval, ce qui en fait un nœud utile pour disséquer l’architecture des voies MAPK dans des modèles cellulaires humains.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO JIP-1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène MAPK8IP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du MAPK8IP1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert MAPK8IP1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine JIP-1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en MAPK8IP1 pour l'étude de la signalisation de JIP-1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de MAPK8IP1 essentiels à la fonction de JIP-1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de MAPK8IP1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le JIP-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le JIP-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus MAPK8IP1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le JIP-1 plasmide HDR (h) et le JIP-1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie MAPK8IP1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles MAPK8IP1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.