Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
IP-10 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421031
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IP-10 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico IP-10, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IP-10 Antibody (E-2): sc-374092
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IP-10 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-421031 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Cxcl10 codifica per la chemochina IP-10 (CXCL10), un ligando secreto inducibile dagli interferoni che si lega a CXCR3 per guidare la chemiotassi di cellule T attivate, cellule NK e altre popolazioni immunitarie. IP-10 è comunemente indotta a valle delle vie IFN-γ/STAT1 e dei pathway di rilevamento dei patogeni, modellando il traffico leucocitario, l’attivazione endoteliale e le reti di citochine infiammatorie. Nei modelli murini, Cxcl10 contribuisce al reclutamento di cellule immunitarie nei tessuti infetti o danneggiati e influenza l’equilibrio tra immunità protettiva e immunopatologia. Una segnalazione di CXCL10 deregolata è spesso utilizzata come marcatore e nodo meccanicistico negli studi su infiammazione cronica, risposte di tipo autoimmune e rimodellamento del microambiente immunitario tumorale.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IP-10 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cxcl10 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cxcl10 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cxcl10 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IP-10.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cxcl10 per lo studio della segnalazione di IP-10, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Cxcl10 critici per la funzione di IP-10
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cxcl10 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal IP-10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal IP-10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cxcl10. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal IP-10 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR IP-10 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cxcl10 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cxcl10 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.