Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-404333

Übersicht

ITGAE kodiert Integrin αE (CD103), das mit Integrin β7 zu einem Heterodimer (αEβ7) zusammentritt. Dieses Adhäsionsrezeptor bindet E‑Cadherin und unterstützt die Verankerung von Lymphozyten in epithelialen Geweben. Das Integrin trägt zum Trafficking von Immunzellen, zur Gewebe-Residenz und zur Organisation der immunologischen Synapse bei, indem es Signale aus der extrazellulären Matrix sowie aus Zell‑Zell‑Adhäsion mit Zytoskelett-Umbau und Outside‑in‑Signalwegen verknüpft, die den Aktivierungszustand beeinflussen. CD103 wird breit als Marker gewebsresidenter Gedächtnis‑T‑Zellen und bestimmter Subpopulationen dendritischer Zellen verwendet; seine Funktion überschneidet sich mit Signalwegen, die die Immunität der epithelialen Barriere und die mukosale Überwachung steuern. Fehlregulierte αEβ7‑vermittelte Interaktionen wurden mit entzündlichen und autoimmunen Prozessen in Barrieregeweben sowie mit der Zusammensetzung des Tumor‑Immunmikromilieus in Verbindung gebracht, wodurch ITGAE ein relevantes Ziel für mechanistische Studien zur Immunzellinfiltration und zum epithelial‑immunologischen Crosstalk ist.

Das Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ITGAE-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ITGAE-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ITGAE nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Integrin αE/ITGAE/CD103-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ITGAE-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Integrin αE/ITGAE/CD103-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ITGAE-Exone abzielen, die für die Integrin αE/ITGAE/CD103-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ITGAE-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ITGAE-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Integrin αE/ITGAE/CD103 HDR-Plasmid (h) und Integrin αE/ITGAE/CD103 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ITGAE-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ITGAE-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.