Integrin α4/ITGA4/CD49d Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401336

Visão geral

ITGA4 codifica a integrina α4 (CD49d), um recetor de adesão que forma heterodímeros com a β1 (VLA-4) ou com a β7 para mediar interações célula–célula e célula–matriz com ligandos como VCAM-1 e fibronectina. Por meio da sinalização “outside-in” das integrinas, ITGA4 influencia a remodelação do citoesqueleto, a dinâmica das adesões focais e vias a jusante, incluindo FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK, que regulam migração, sobrevivência e estados de ativação. A integrina α4 é um regulador-chave do tráfego de leucócitos, da organização da sinapse imune e do homing tecidual, ligando-a a circuitos inflamatórios e a interações tumor–estroma. A atividade ou expressão desregulada de ITGA4 é frequentemente estudada em contextos de inflamação crónica, infiltração de células imunes e adesão de células de neoplasias hematológicas em nichos de suporte.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Integrin α4/ITGA4/CD49d (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ITGA4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ITGA4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ITGA4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Integrin α4/ITGA4/CD49d.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ITGA4 para a investigação da sinalização de Integrin α4/ITGA4/CD49d, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ITGA4 críticos para a função Integrin α4/ITGA4/CD49d
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ITGA4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Integrin α4/ITGA4/CD49d Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Integrin α4/ITGA4/CD49d Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ITGA4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Integrin α4/ITGA4/CD49d Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Integrin α4/ITGA4/CD49d (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ITGA4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ITGA4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.