Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401336

Übersicht

ITGA4 kodiert Integrin α4 (CD49d), einen Adhäsionsrezeptor, der mit β1 (VLA-4) oder β7 heterodimerisiert, um Zell‑Zell‑ und Zell‑Matrix‑Interaktionen mit Liganden wie VCAM-1 und Fibronectin zu vermitteln. Über das Outside-in-Signaling von Integrinen beeinflusst ITGA4 den Umbau des Zytoskeletts, die Dynamik fokaler Adhäsionen sowie nachgeschaltete Signalwege einschließlich FAK/Src, PI3K–AKT und MAPK, die Migration, Überleben und Aktivierungszustände steuern. Integrin α4 ist ein zentraler Regulator des Leukozytentransports, der Organisation der immunologischen Synapse und des Tissue-Homings und ist damit mit Entzündungsnetzwerken und Tumor‑Stroma‑Interaktionen verknüpft. Eine fehlregulierte ITGA4‑Aktivität oder ‑Expression wird häufig im Kontext chronischer Entzündung, Immunzellinfiltration und der Adhäsion hämatologischer Malignomzellen in unterstützenden Nischen untersucht.

Das Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ITGA4-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ITGA4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ITGA4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Integrin α4/ITGA4/CD49d-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ITGA4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Integrin α4/ITGA4/CD49d-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ITGA4-Exone abzielen, die für die Integrin α4/ITGA4/CD49d-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ITGA4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ITGA4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Integrin α4/ITGA4/CD49d HDR-Plasmid (h) und Integrin α4/ITGA4/CD49d HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ITGA4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ITGA4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.