Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401275

Übersicht

ITGA1 kodiert Integrin α1 (CD49a), das mit Integrin β1 ein Heterodimer bildet und als Kollagen- und Laminin-bindender Rezeptor die Zell–Extrazellulärmatrix-Adhäsion sowie die Mechanotransduktion vermittelt. Über den Aufbau fokaler Adhäsionen und die Signalweiterleitung über FAK/Src-, PI3K–AKT- und MAPK-Signalwege beeinflusst Integrin α1 kontextabhängig die Organisation des Zytoskeletts, Migration, Proliferation und das Überleben von Zellen. Die ITGA1-Aktivität trägt zur Regulation des Gewebeumbaus und der Positionierung von Entzündungszellen bei, indem sie die Adhäsionsdynamik und nachgeschaltete transkriptionelle Antworten prägt. Eine veränderte Signalübertragung von Integrin α1/β1 wurde mit dysregulierten Zell–Matrix-Interaktionen in Verbindung gebracht, wie sie bei Fibrose, Tumor–Stroma-Wechselwirkungen und dem Umbau des Immunmikromilieus beobachtet werden, was ITGA1 zu einem nützlichen Ziel für signalwegorientierte Studien macht.

Das Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ITGA1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ITGA1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ITGA1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Integrin α1/ITGA1/CD49a-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ITGA1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Integrin α1/ITGA1/CD49a-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ITGA1-Exone abzielen, die für die Integrin α1/ITGA1/CD49a-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ITGA1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ITGA1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Integrin α1/ITGA1/CD49a HDR-Plasmid (h) und Integrin α1/ITGA1/CD49a HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ITGA1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ITGA1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.