Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-2Rγ Double Nickase Plasmid (h): sc-401876-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IL-2Rγ Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IL-2Rγ Double-Nickase-Plasmid (h) und IL-2Rγ Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IL2RG abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-2Rγ: sc-271060
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-2Rγ Double Nickase Plasmid (h) | sc-401876-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-2Rγ Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401876-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL2RG kodiert die gemeinsame Gamma‑Kette (IL‑2Rγ, CD132), eine essenzielle Signalkomponente, die von mehreren Zytokinrezeptoren gemeinsam genutzt wird – darunter die Rezeptoren für IL‑2, IL‑4, IL‑7, IL‑9, IL‑15 und IL‑21. Nach Bindung des Zytokins koppelt IL‑2Rγ die Rezeptorkomplexe an JAK3 und die nachgeschaltete STAT‑Signalübertragung und koordiniert so Entwicklung, Überleben und Effektordifferenzierung von Lymphozyten in T‑Zellen, B‑Zellen und NK‑Zellen. Diese Achse ist in umfassendere Programme der Immunregulation eingebunden, etwa zytokingetriebene Proliferation, Differenzierung und homöostatische Aufrechterhaltung. Störungen der IL2RG‑abhängigen Signalübertragung sind stark mit schweren Defekten der Funktion adaptiver und angeborener Immunzellen verknüpft, wodurch IL2RG ein zentrales Gen für mechanistische Studien zu Immundefizienz und Zytokinrezeptor‑Signalgebung ist.
IL-2Rγ Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IL2RG-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IL2RG abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IL2RG-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IL2RG-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.