IL-18Rβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421095

Übersicht

Il18rap kodiert das IL-18-Rezeptor-Accessory-Protein (IL-18Rβ), einen essenziellen Korezeptor, der mit IL-18Rα ein Heterodimer bildet und so einen funktionsfähigen IL-18-Rezeptorkomplex auf Immunzellen erzeugt. Nach Bindung von IL-18 trägt IL-18Rβ zur Rekrutierung von MyD88 sowie der nachgeschalteten IRAK/TRAF6-Signalgebung bei, fördert die Aktivierung der NF-κB- und MAPK-Signalwege und induziert die Bildung entzündlicher Zytokine wie IFN-γ. Diese Achse beeinflusst die Th1-Polarisierung, die Effektorfunktion von NK-Zellen und die Aktivierung myeloider Zellen und verknüpft Il18rap damit mit der Regulation angeborener und adaptiver Immunantworten. Eine veränderte IL-18/IL-18R-Signalgebung wird mit entzündlichen und autoimmunen Prozessen in Verbindung gebracht und häufig in Mausmodellen zu Infektionen, steriler Entzündung und Tumorimmunologie untersucht.

Das IL-18Rβ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Il18rap-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Il18rap-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Il18rap nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IL-18Rβ-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Il18rap-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IL-18Rβ-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Il18rap-Exone abzielen, die für die IL-18Rβ-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Il18rap-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IL-18Rβ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom IL-18Rβ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Il18rap-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IL-18Rβ HDR-Plasmid (m) und IL-18Rβ HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Il18rap-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Il18rap-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.