IL-13Rα2 CRISPR Activation Plasmid (h): sc-402525-ACT
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- IL-13Rα2 CRISPR Activation Plasmid (h) ist ein Transkriptionsaktivierungs System (SAM) welches für die gezielte Verstärkung der Genexpression bestimmt ist
- IL-13Rα2 CRISPR Aktivierungsplasmide (h) bestehen aus 3 Plasmiden im Massenverhältnis 1:1:1: ein Plasmid kodiert für die deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungsdomaine VP64 sowie ein Gen für die Blasticidin Resistenz; ein zweites Plasmid kodierend für das MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein sowie ein Gen für die Hygromycin Resistenz; ein drittes Plasmid kodierd für die Ziel-spezifische 20 nt guide RNA fusioniert an zwei MS2 RNA Aptamere sowie ein Gen für die Puromycin Resistenz.
- Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.
- Die vom IL-13Rα2 CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) und vom IL-13Rα2 CRISPR-Aktivierungsplasmid (h2) kodierten gRNAs zielen auf unterschiedliche regulatorische Regionen stromaufwärts der IL13RA2-Transkriptionsstartstelle ab. Eines oder beide Designs sind möglicherweise verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-13Rα2: sc-134363
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-13Rα2 CRISPR Activation Plasmid (h) | sc-402525-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
IL-13Rα2 CRISPR Activation Plasmid (h2) | sc-402525-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
Human IL13RA2 kodiert den Interleukin-13-Rezeptor Alpha 2 (IL-13Rα2), eine hochaffine IL‑13-bindende Rezeptoruntereinheit, die die Typ‑2-Zytokinsignalgebung an der Zelloberfläche moduliert. Indem IL‑13Rα2 IL‑13‑getriebene Antworten und die Dynamik von Rezeptorkomplexen mitprägt, beeinflusst es nachgeschaltete Programme, die mit entzündlicher Signalgebung und Übergängen des Zellzustands verknüpft sind, einschließlich Signalwege, die je nach zellulärem Kontext mit JAK/STAT‑ und MAPK‑assoziierten transkriptionellen Outputs konvergieren. Die IL13RA2-Expression wird häufig als Marker für eine veränderte Zytokinantwort genutzt und wurde mit Tumorbiologie, Interaktionen im Immunmikromilieu und neuroinflammatorischen Prozessen in Verbindung gebracht. Diese Eigenschaften machen IL‑13Rα2 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien zur Regulation von Zytokinrezeptoren, zur Ligandensequestrierung und zur Umverdrahtung von Signalwegen in krankheitsrelevanten Modellen.
IL-13Rα2 Das CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) bietet einen gezielten, nicht-destruktiven Ansatz zur Hochregulierung der endogenen IL13RA2-Expression, ohne die zugrunde liegende DNA-Sequenz zu verändern.
IL-13Rα2 Das CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) ist ein aus drei Plasmiden bestehendes synergistisches Aktivierungsmediator-System (SAM), das für eine hocheffiziente, ortsspezifische transkriptionelle Hochregulation des IL13RA2-Lokus in menschlichen Zelllinien entwickelt wurde. Das System basiert auf einem katalytisch inaktiven Cas9 (dCas9), das zwei inaktivierende Mutationen (D10A und N863A) trägt, welche die Nukleaseaktivität eliminieren, während die DNA-Bindung erhalten bleibt. Dieses dCas9 ist mit VP64, einem potenten Transkriptionsaktivator, fusioniert und wird zusammen mit einem Blasticidin-Resistenzgen zur Selektion koexprimiert. Das zweite Plasmid kodiert das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein, einen sekundären Aktivatorkomplex, der zusammen mit dCas9-VP64 wirkt, sowie ein Hygromycin-Resistenzgen. Das dritte Plasmid kodiert für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA, die an zwei MS2-RNA-Aptamere fusioniert ist, welche den MS2-p65-HSF1-Komplex an die Aktivierungsstelle rekrutieren, begleitet von einem Puromycin-Resistenzgen. Die drei Plasmide werden im Massenverhältnis 1:1:1 verabreicht, um eine ausgewogene Expression aller Systemkomponenten zu gewährleisten.
Nach der Assemblierung am Zielort bindet der SAM-Komplex etwa 200 bp stromaufwärts der IL13RA2-Transkriptionsstartstelle, wo VP64, p65 und HSF1 gemeinsam die Transkriptionsmaschinerie rekrutieren und die Hochregulation der endogenen IL-13Rα2-Expression vorantreiben. Im Gegensatz zu nukleaseaktivem Cas9 verursacht dCas9 keine Doppelstrangbrüche und verändert die genomische Sequenz nicht, wodurch der native IL13RA2-Locus erhalten bleibt und die Untersuchung von IL-13Rα2-abhängigen Transkriptionsreaktionen am endogenen Locus ermöglicht wird. Dies macht es zu einem wertvollen Werkzeug für Funktionsstudien, die Identifizierung von Zielgenen und die Modellierung der Wiederherstellung des IL-13Rα2-Signalwegs in Tumorzellen mit stillgelegtem oder reduziertem IL13RA2-Ausdruck.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.