Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (m) IKK-ε: sc-425196-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IKK-ε correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IKK-ε Double Nickase (m) et le plasmide IKK-ε Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ikbke. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IKK-ε Antibody (A-11): sc-376114
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) IKK-ε | sc-425196-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) IKK-ε | sc-425196-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Ikbke* code IKK-ε, une kinase IκB non canonique qui intègre les signaux de l’immunité innée et de l’inflammation en aval des récepteurs de reconnaissance des motifs (PRR) et des signaux des cytokines. IKK-ε contribue à l’activation des programmes IRF3/IRF7 et NF-κB, influençant la production d’interférons de type I, les réponses antivirales et le contrôle transcriptionnel des médiateurs immunitaires. Au-delà de la défense de l’hôte, la signalisation dépendante d’*Ikbke* recoupe des voies régulant la survie cellulaire, les réponses au stress métabolique et l’inflammation associée aux tumeurs. Une activité d’IKK-ε dérégulée a été impliquée dans des modèles d’auto-immunité, d’inflammation chronique et de signalisation oncogénique, ce qui fait d’*Ikbke* un nœud utile pour la cartographie des voies et la génomique fonctionnelle dans des systèmes murins.
IKK-ε Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ikbke dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ikbke. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ikbke. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ikbke.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.