Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IGFBP5 Double Nickase Plasmid (m): sc-421066-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IGFBP5 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IGFBP5 Double-Nickase-Plasmid (m) und IGFBP5 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Igfbp5 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IGFBP5: sc-515116
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IGFBP5 Double Nickase Plasmid (m) | sc-421066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP5 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-421066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen **Igfbp5** kodiert das insulinähnliche Wachstumsfaktor‑Bindungsprotein 5 (**IGFBP5**), einen sezernierten und mit der extrazellulären Matrix (EZM) assoziierten Regulator, der die Bioverfügbarkeit und Signalübertragung von IGF‑I/IGF‑II über den **IGF1R–PI3K/AKT**‑ und **MAPK**‑Signalweg moduliert. Über die Sequestrierung von IGFs hinaus kann IGFBP5 durch Interaktionen mit EZM‑Komponenten sowie kontextabhängige, IGF‑unabhängige Aktivitäten Zelladhäsion, Migration und Überleben beeinflussen. Die **Igfbp5**‑Expression ist mit Gewebeumbauprozessen verknüpft, darunter Myogenese, Osteogenese und Fibroblastenaktivierung, und ist damit relevant für Studien zu Fibrose, Wundheilung und Skelettentwicklung. Eine dysregulierte IGFBP5‑Expression wurde mit veränderten Proliferations‑ und Differenzierungsprogrammen in Tumormikroumgebungen sowie mit stromalem Remodeling in Verbindung gebracht, was ihre Nutzung als mechanistischer Knotenpunkt in der Forschung zur Wachstumsfaktor‑Signalgebung unterstützt.
IGFBP5 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Igfbp5-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Igfbp5 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Igfbp5-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Igfbp5-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.