IFN-γRβ Double Nickase Plasmid (h): sc-402794-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IFN-γRβ Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IFN-γRβ Double-Nickase-Plasmid (h) und IFN-γRβ Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IFNGR2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IFN-γRβ: sc-377291
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IFN-γRβ Double Nickase Plasmid (h) | sc-402794-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFN-γRβ Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402794-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Interferon-Gamma-Rezeptor 2 (IFNGR2) kodiert IFN-γRβ, die akzessorische Signaluntereinheit des Typ-II-Interferonrezeptor-Komplexes, die zusammen mit IFNGR1 zelluläre Antworten auf Interferon-γ vermittelt. Nach Ligandenbindung unterstützt IFN-γRβ die Aktivierung der JAK1/JAK2–STAT1-Achse und fördert STAT1-abhängige Transkriptionsprogramme, die Antigenpräsentation, Makrophagenaktivierung und antimikrobielle Immunität prägen. Die Funktion von IFNGR2 beeinflusst die Wechselwirkung mit umfassenderen Entzündungs- und immunregulatorischen Signalwegen, einschließlich interferonstimulierter Gen-Netzwerke und Zytokin-Signalkreisläufe. Genetische oder funktionelle Störungen von IFNGR2 gehen mit einer verminderten IFN-γ-Reaktionsfähigkeit und einer Anfälligkeit für schwere Infektionen einher, was es zu einem zentralen Ziel für die Untersuchung von Wirtsabwehrmechanismen und Immunfehlregulation macht.
IFN-γRβ Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IFNGR2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IFNGR2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IFNGR2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IFNGR2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.