Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IFN-α/βRα Double Nickase Plasmid (h): sc-401662-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IFN-α/βRα Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IFN-α/βRα Double-Nickase-Plasmid (h) und IFN-α/βRα Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IFNAR1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IFN-α/βRα: sc-7391
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IFN-α/βRα Double Nickase Plasmid (h) | sc-401662-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFN-α/βRα Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401662-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IFNAR1 kodiert den Interferon-Alpha/Beta-Rezeptor Alpha (IFN‑α/βRα), eine Zelloberflächen-Untereinheit des Typ‑I-Interferonrezeptors, die IFN‑α und IFN‑β bindet und dadurch die angeborene Immun-Signalübertragung initiiert. Die Ligandenbindung fördert die Aktivierung der Kinasen JAK1 und TYK2 sowie nachgeschalteter STAT1/STAT2–IRF9-(ISGF3)-Komplexe und treibt so die Transkription interferon-stimulierter Gene an, die die antivirale Abwehr, die Antigenpräsentation und die Kommunikation zwischen Immunzellen regulieren. Die IFNAR1-Aktivität wird außerdem durch Rezeptorinternalisierung und ubiquitinvermittelten Abbau geprägt, was Signalstärke und -dauer beeinflusst. Fehlregulierte Typ‑I-Interferonwege unter Beteiligung von IFNAR1 werden breit in entzündlichen und autoimmunen Zusammenhängen sowie bei Tumor–Immun-Interaktionen und Phänotypen der Wirt–Pathogen-Antwort untersucht.
IFN-α/βRα Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IFNAR1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IFNAR1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IFNAR1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IFNAR1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.