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IFIT2双切口酶质粒(h) | sc-403830-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFIT2双切口酶质粒(h2) | sc-403830-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
具有四联四肽重复序列2的干扰素诱导蛋白(IFIT2)是一种干扰素刺激基因,编码位于细胞质的抗病毒效应分子,能够结合多种RNA,并在先天免疫反应过程中调控翻译以及RNA代谢。IFIT2在I型干扰素信号通路下游被诱导,其表达通过JAK–STAT通路及由ISGF3驱动的转录而上调,并与其他IFIT家族成员一道整合进更广泛的抗病毒程序。通过与病毒及宿主RNA的相互作用,并调节应激与凋亡通路,IFIT2有助于限制病毒复制并塑造炎症输出。IFIT2表达失调与感染、肿瘤生物学以及免疫介导性疾病中观察到的干扰素特征改变相关,因此可作为解析干扰素通路调控的一个有用节点。
IFIT2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IFIT2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IFIT2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IFIT2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IFIT2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。