Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) ICAM-1/CD54: sc-421013-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ICAM-1/CD54 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ICAM-1/CD54 Double Nickase (m) et le plasmide ICAM-1/CD54 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Icam1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ICAM-1/CD54 Antibody (G-5): sc-8439
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ICAM-1/CD54 | sc-421013-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Icam1* code la molécule d’adhérence intercellulaire 1 (ICAM‑1/CD54), un récepteur inductible de la superfamille des immunoglobulines exprimé sur les cellules endothéliales, les leucocytes ainsi que de nombreuses lignées stromales et épithéliales lors de l’inflammation. ICAM‑1 se lie à des intégrines telles que LFA‑1 (ITGAL/ITGB2) et Mac‑1 (ITGAM/ITGB2) afin de favoriser une adhérence ferme, la transmigration et la stabilisation de la synapse immunologique, reliant des programmes induits par les cytokines à une signalisation dépendante des contacts cellule‑cellule. Son expression est régulée par des voies inflammatoires, notamment NF‑κB et JAK/STAT, en réponse à des stimuli tels que le TNF‑α et l’IL‑1, coordonnant le recrutement des leucocytes et l’activation vasculaire. Une biologie d’ICAM‑1 dérégulée est fréquemment étudiée dans des modèles d’auto-immunité, d’infection, d’inflammation chronique et d’interactions tumeur–système immunitaire, où l’adhérence et le trafic cellulaire façonnent la pathologie tissulaire.
ICAM-1/CD54 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Icam1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Icam1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Icam1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Icam1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.