Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO hnRNP E1 (m): sc-423930
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- hnRNP E1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique hnRNP E1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: hnRNP E1 Antibody (E-2): sc-137249
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO hnRNP E1 (m) | sc-423930 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Pcbp1 code pour la ribonucléoprotéine nucléaire hétérogène E1 (hnRNP E1) de la souris, une protéine liant l’ARN qui reconnaît des éléments riches en cytosine (C) afin de contrôler la stabilité et la traduction des ARNm. hnRNP E1 participe à la régulation génique post‑transcriptionnelle liée à la progression du cycle cellulaire, aux réponses au stress et à la différenciation, en modulant la disponibilité des transcrits dans le cytoplasme et leur traduction au niveau des ribosomes. Par ses rôles dans la maturation des ARN et le contrôle traductionnel, hnRNP E1 influence des voies associées à la transition épithélio‑mésenchymateuse, au remodelage du cytosquelette et à des programmes d’expression génique dépendants de la signalisation. Une activité dérégulée de PCBP1/hnRNP E1 a été associée, dans des modèles expérimentaux, à une homéostasie de l’ARN altérée et à des phénotypes pertinents pour la biologie tumorale et la signalisation inflammatoire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO hnRNP E1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Pcbp1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Pcbp1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Pcbp1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine hnRNP E1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Pcbp1 pour l'étude de la signalisation de hnRNP E1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Pcbp1 essentiels à la fonction de hnRNP E1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Pcbp1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le hnRNP E1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le hnRNP E1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Pcbp1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le hnRNP E1 plasmide HDR (m) et le hnRNP E1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Pcbp1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Pcbp1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.