Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HLA-DRα Plasmide Double Nickase (h): sc-401010-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HLA-DRα Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HLA-DRα Double Nickase Plasmid (h) e il HLA-DRα Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HLA-DRA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HLA-DRα Antibody (G-7): sc-55593
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HLA-DRα Plasmide Double Nickase (h) | sc-401010-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HLA-DRα Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401010-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HLA-DRA codifica la catena HLA-DRα, un componente fondamentale degli eterodimeri HLA-DR di classe II del MHC che presentano ai linfociti T CD4+ peptidi derivati dall’ambiente extracellulare. Questa via di presentazione dell’antigene funziona tramite processamento endosomiale, traffico della catena invariante (CD74) e caricamento del peptide regolato da HLA-DM, collegando il riconoscimento innato all’attivazione dell’immunità adattativa. L’espressione di HLA-DRα è strettamente controllata da CIITA e da programmi trascrizionali responsivi all’interferone-γ ed è comunemente utilizzata come marcatore di differenziamento e attivazione delle cellule presentanti l’antigene. Alterazioni della biologia di HLA-DR sono state implicate nella suscettibilità a malattie immunomediate e in stati infiammatori attraverso effetti sul repertorio peptidico e sul priming dei linfociti T.
HLA-DRα Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HLA-DRA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HLA-DRA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HLA-DRA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HLA-DRA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.