Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Histone H10 (m): sc-420754
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Histone H10 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Histone H10, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Histone H10 Antibody (34): sc-56695
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Histone H10 (m) | sc-420754 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Chez la souris, H1f0 code l’histone H1⁰, une histone de liaison associée à la différenciation, qui se fixe à l’ADN nucléosomal pour stabiliser la compaction de la chromatine de plus haut ordre et influer sur l’accessibilité du génome. En modulant l’espacement des nucléosomes et la dynamique de la chromatine, H1⁰ contribue au contrôle épigénétique des programmes transcriptionnels lors de la sortie du cycle cellulaire, de l’engagement de lignée et de la sénescence cellulaire. Des modifications de l’abondance ou de la répartition de H1⁰ ont été associées à des changements de l’état de la chromatine, de la stabilité génomique et à une régulation transcriptionnelle aberrante observés dans la biologie du cancer et d’autres troubles impliquant une différenciation perturbée. En tant que protéine architecturale de la chromatine, H1⁰ est fréquemment étudiée dans des voies qui régissent l’organisation de l’hétérochromatine, les réponses aux dommages de l’ADN et la régulation génique à longue distance.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Histone H10 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène H1f0 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du H1f0, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert H1f0 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Histone H10.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en H1f0 pour l'étude de la signalisation de Histone H10, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de H1f0 essentiels à la fonction de Histone H10
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de H1f0 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Histone H10 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Histone H10 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus H1f0. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Histone H10 plasmide HDR (m) et le Histone H10 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie H1f0 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles H1f0 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.