Histone Deacetylase 9 (HDAC9) Double Nickase Plasmid (h): sc-401419-NIC

HDAC9 kodiert die Histondeacetylase 9, eine HDAC der Klasse IIa, die als signalabhängiger transkriptioneller Koregulator fungiert und Chromatin-Remodeling mit Umweltreizen verknüpft. HDAC9 pendelt zwischen Zellkern und Zytoplasma und moduliert Genexpressionsprogramme über HDAC-haltige Komplexe, wodurch es das Gleichgewicht der Histonacetylierung, die Enhancer-Aktivität und die linien-/zelltypspezifische Transkription beeinflusst. Es ist in Signalwege eingebunden, die von Transkriptionsfaktoren der MEF2-Familie gesteuert werden, sowie in breitere epigenetische Mechanismen, die Zelldifferenzierung, Stoffwechsel und Stressantworten regulieren. Eine veränderte Expression oder Aktivität von HDAC9 wurde mit fehlregulierten Transkriptionsnetzwerken in Verbindung gebracht, die für die kardiovaskuläre Biologie, die Funktion von Immunzellen und onkogene Phänotypen relevant sind, was es zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien der epigenetischen Regulation macht.

Histone Deacetylase 9 (HDAC9) Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des HDAC9-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von HDAC9 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die HDAC9-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.

Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit HDAC9-Störung.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.