HEMK2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406503
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HEMK2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HEMK2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HEMK2 Anticorpo (1C4): sc-517120
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HEMK2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406503 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
N6AMT1 (também conhecido como HEMK2) codifica uma metiltransferase que catalisa a metilação de proteínas, contribuindo para a regulação da fidelidade da tradução e de processos associados aos ribossomos. O HEMK2 tem sido associado à metilação de componentes envolvidos na terminação da tradução e de elementos ribossomais, conectando-o a vias de proteostase e a respostas ao estresse celular que dependem de uma síntese proteica precisa. Alterações na atividade de N6AMT1/HEMK2 têm sido estudadas em contextos que envolvem estabilidade genômica, sinalização de estresse mitocondrial e oxidativo e desregulação do controle de crescimento, tornando-o relevante para estudos mecanísticos em biologia do câncer e em outros distúrbios caracterizados por manutenção perturbada do proteoma. Sua função enzimática e ampla integração celular sustentam seu uso como um nó para investigar redes de modificações pós-traducionais e adaptações transcricionais e metabólicas a jusante.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HEMK2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene N6AMT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do N6AMT1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do N6AMT1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HEMK2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de N6AMT1 para a investigação da sinalização de HEMK2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) N6AMT1 críticos para a função HEMK2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos N6AMT1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HEMK2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HEMK2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus N6AMT1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HEMK2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HEMK2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia N6AMT1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo N6AMT1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.