H2-Q1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420774

Descripción general

H2-Q1 codifica en el ratón una molécula no clásica del MHC de clase I (clase Ib) que contribuye a la presentación de antígenos y a la señalización inmunorreguladora en la superficie celular. En comparación con las moléculas H-2 clásicas, H2-Q1 suele asociarse a una unión de péptidos especializada y al reconocimiento por subpoblaciones de linfocitos T y por receptores de células NK, lo que influye en la vigilancia inmunitaria y la tolerancia periférica. Su expresión y función se entrecruzan con vías que controlan la activación de linfocitos, la inflamación impulsada por citocinas y la homeostasis tisular mediada por el sistema inmunitario. El reconocimiento dependiente de clase I desregulado se estudia con frecuencia en contextos como la autoinmunidad, las infecciones y la inmunología tumoral, lo que convierte a H2-Q1 en un locus útil para desentrañar mecanismos de evasión inmunitaria e inmunopatología.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO H2-Q1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen H2-Q1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del H2-Q1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de H2-Q1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína H2-Q1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en H2-Q1 para la investigación de la señalización de H2-Q1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de H2-Q1 críticos para la función de H2-Q1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de H2-Q1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido H2-Q1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido H2-Q1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus H2-Q1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR H2-Q1 (m) y el plásmido HDR H2-Q1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología H2-Q1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana H2-Q1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.