Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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GM130 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400787-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- GM130 as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- GM130 As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo GM130 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo GM130 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor GOLGA2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: GM130 Anticorpo (H-7): sc-55590
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GM130 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-400787-LAC | 200 µl | $455.00 |
GOLGA2 codifica a proteína da matriz do cis-Golgi GM130, um fator de ancoragem periférico de membrana que ajuda a organizar a arquitetura do “ribbon” do Golgi e a manter as cisternas empilhadas. A GM130 coordena a captura e a fusão de vesículas por meio de interações com p115/USO1 e outros golgins, dá suporte ao tráfego dependente de COPI/COPII e contribui para o posicionamento do centrossomo, a organização de microtúbulos e a polaridade celular. Por suas funções no fluxo da via secretória e na integridade do Golgi, alterações na função da GM130 são relevantes para respostas ao estresse celular, migração e fenótipos observados em modelos de doenças proliferativas e neurodegenerativas, nas quais a fragmentação do Golgi e o desequilíbrio do tráfego são comuns. Esses processos fazem de GOLGA2 um nó útil para estudar tráfego de membranas, biogênese de organelas e sinalização ligada à proteostase e ao controle do ciclo celular.
As Partículas de Ativação Lentivirais GM130 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de GOLGA2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais GM130 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição GOLGA2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de GM130. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo GOLGA2 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.