Glutathione reductase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-417499

개요

GSR는 인간 글루타티온 환원효소(glutathione reductase)를 암호화하는 FAD 의존성 산화환원효소로, NADPH를 사용해 산화형 글루타티온(GSSG)을 환원형 글루타티온(GSH)으로 재생함으로써 세포 내 레독스 항상성을 유지합니다. GSR는 GSH 풀을 유지함으로써 활성산소종(ROS)의 해독을 돕고, 단백질의 티올(thiol) 상태를 보존하며, 세포질 및 미토콘드리아 구획 전반에서 레독스 민감성 신호전달을 조절합니다. 이러한 활성은 오탄당인산경로(PPP)와 같은 NADPH 생성 경로와 연계되며, 산화성·대사성·염증성 스트레스 상황에서 세포 방어에 기여합니다. GSR의 기능 또는 발현 변화는 용혈성 표현형, 신경퇴행성 과정, 암세포의 산화 스트레스 적응 등 레독스 불균형과 관련된 맥락에서 흔히 연구됩니다.

Glutathione reductase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GSR 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GSR 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GSR의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Glutathione reductase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Glutathione reductase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GSR 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Glutathione reductase 기능에 중요한 GSR 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GSR 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Glutathione reductase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Glutathione reductase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GSR 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Glutathione reductase HDR 플라스미드 (h) 및 Glutathione reductase HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GSR 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GSR 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.