Glucose Transporter Glut2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400347

Visão geral

SLC2A2 codifica o transportador de glicose 2 (GLUT2), um transportador facilitador de hexoses que medeia o fluxo bidirecional de glicose através da membrana plasmática de forma dependente da concentração. Em tecidos humanos, o GLUT2 contribui para a deteção de nutrientes e para a homeostase metabólica ao sustentar a captação e a libertação de glicose e ao influenciar vias a jusante ligadas à glicólise, à gluconeogénese e à dinâmica da secreção de insulina. Alterações na expressão ou na função de SLC2A2 têm sido associadas a desregulação do processamento da glicose e a fenótipos metabólicos, tornando-o relevante para estudos da biologia da diabetes, da produção hepática de glicose e da função das ilhotas pancreáticas. Como o GLUT2 também pode transportar outras hexoses, a perturbação de SLC2A2 afeta de forma mais ampla a utilização de carboidratos e o equilíbrio energético celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC2A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC2A2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC2A2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Glucose Transporter Glut2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC2A2 para a investigação da sinalização de Glucose Transporter Glut2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC2A2 críticos para a função Glucose Transporter Glut2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC2A2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Glucose Transporter Glut2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Glucose Transporter Glut2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC2A2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Glucose Transporter Glut2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Glucose Transporter Glut2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC2A2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC2A2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.