GLTSCR1 Double Nickase Plasmid (h): sc-409913-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das GLTSCR1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- GLTSCR1 Double-Nickase-Plasmid (h) und GLTSCR1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GLTSCR1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: GLTSCR1: sc-515086
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
GLTSCR1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-409913-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GLTSCR1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-409913-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLTSCR1 (Gliom-Tumorsuppressor-Kandidatenregion-Gen 1) kodiert ein nukleäres Protein, das an der Regulation chromatinassoziierter Prozesse und der transkriptionellen Kontrolle beteiligt ist, was mit einer Rolle bei der Aufrechterhaltung korrekter Genexpressionsprogramme vereinbar ist. Berichtete Interaktionen verknüpfen GLTSCR1 mit epigenetischen Regulationskomplexen und Signalwegen, die den Zellzyklusverlauf, DNA-Schadensantworten und zelluläre Differenzierungszustände beeinflussen. Eine veränderte GLTSCR1-Expression oder genomische Störungen wurden mit tumorrelevanten Kontexten in Verbindung gebracht, insbesondere in gliomassoziierten Regionen, was seine Relevanz für die Untersuchung von Mechanismen der onkogenen transkriptionellen Umprogrammierung unterstreicht. Als menschliches Gen wird GLTSCR1 häufig in Modellen untersucht, die die nukleäre Organisation, Chromatinregulation und Genotyp-Phänotyp-Beziehungen in der Biologie proliferativer Erkrankungen analysieren.
GLTSCR1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GLTSCR1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GLTSCR1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GLTSCR1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GLTSCR1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.