GLT25D1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405631

개요

COLGALT1은 소포체(ER)에 국재하는 콜라겐 β(1-O) 갈락토실전이효소인 GLT25D1을 암호화하며, 콜라겐의 번역 후 수식 과정에서 하이드록시리신 잔기의 갈락토실화를 촉매합니다. 이 반응은 콜라겐의 올바른 접힘, 안정성, 분비를 뒷받침하는 연속적 당화 경로의 일부로서, 세포외기질(ECM) 조립과 기저막 조직화에 영향을 줍니다. GLT25D1의 활성은 ER 단백질 항상성(proteostasis) 및 분비성 수송(trafficking)과도 교차하며, 콜라겐 당화가 변하면 기질–세포 신호전달과 조직 역학이 교란될 수 있습니다. COLGALT1을 포함한 콜라겐 당화 효소의 유전적 기능 손상 또는 발현 이상은 결합조직 및 발달 관련 표현형과 연관되어 왔고, 기질 주도 섬유화, 근골격계 질환, 종양 미세환경 재형성 맥락에서 연구되고 있습니다.

GLT25D1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 COLGALT1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 COLGALT1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 COLGALT1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GLT25D1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GLT25D1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 COLGALT1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GLT25D1 기능에 중요한 COLGALT1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 COLGALT1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GLT25D1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GLT25D1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 COLGALT1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GLT25D1 HDR 플라스미드 (h) 및 GLT25D1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 COLGALT1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 COLGALT1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.