Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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galectin-4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2): sc-421417-KO-2
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- galectin-4 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im galectin-4-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: galectin-4: sc-271209
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
galectin-4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) | sc-421417-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Lgals4 kodiert das β-Galactosid-bindende Lektin Galectin-4, ein Tandem-Repeat-Galectin, das im intestinalen Epithel angereichert ist und mit glykosylierten Membranproteinen und Glykolipiden assoziiert, um apikale Mikrodomänen zu organisieren und Zell-Zell- sowie Zell-Matrix-Interaktionen zu regulieren. Galectin-4 trägt zur epithelialen Differenzierung, zur Aufrechterhaltung der Barriere und zum Transport von Glykoproteinen bei und kann über kohlenhydratabhängige Bindung an der Zelloberfläche Signalwege und die Immunkommunikation modulieren. In Mausgeweben wurde eine veränderte Lgals4-Expression mit Veränderungen der mukosalen Entzündung und der epithelialen Homöostase in Verbindung gebracht, was das Gen für Studien zur Darmphysiologie und zu entzündungsassoziiertem Remodeling relevant macht. Seine Lektinaktivität unterstützt zudem die Untersuchung glykosylierungsabhängiger Signalwege, die Adhäsion, Migration und epitheliale Stressantworten beeinflussen.
Das galectin-4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Lgals4-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Lgals4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Lgals4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die galectin-4-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Lgals4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der galectin-4-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Lgals4-Exone abzielen, die für die galectin-4-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Lgals4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom galectin-4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom galectin-4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Lgals4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das galectin-4 HDR-Plasmid (m) und galectin-4 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Lgals4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Lgals4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.