Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) G3BP1: sc-400745-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) G3BP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide G3BP1 Double Nickase (h) et le plasmide G3BP1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant G3BP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: G3BP1 Antibody (H-10): sc-365338
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) G3BP1 | sc-400745-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) G3BP1 | sc-400745-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
G3BP1 (facteur 1 d’assemblage des granules de stress G3BP) est une protéine liant l’ARN qui coordonne la nucléation des granules de stress et régule la stabilité et la traduction des ARNm lors du stress cellulaire. Elle relie des signaux issus de voies telles que RAS/MAPK et PI3K/AKT au contrôle post‑transcriptionnel de l’expression génique via des interactions avec les sous-unités ribosomiques 40S, des facteurs d’initiation de la traduction et des ARN viraux ou cellulaires. G3BP1 contribue également à la signalisation de l’immunité innée et aux réponses antivirales en modulant la détection de l’ARN et la dynamique des ribonucléoprotéines. Une activité dérégulée de G3BP1 et de la biologie des granules de stress a été associée à l’adaptation des cellules cancéreuses, à la neurodégénérescence et à des mécanismes de réplication virale, ce qui en fait une cible utile pour des études de dissection des voies de signalisation.
G3BP1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus G3BP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de G3BP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de G3BP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de G3BP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.