FOXL2 Plasmide Double Nickase (h): sc-403351-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FOXL2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FOXL2 Double Nickase Plasmid (h) e il FOXL2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FOXL2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FOXL2 Antibody (262C1a): sc-81275
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FOXL2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403351-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXL2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403351-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXL2 codifica un fattore di trascrizione della famiglia forkhead essenziale per la differenziazione delle cellule della granulosa ovarica, per il mantenimento dell’identità ovarica e per la regolazione di geni coinvolti nella steroidogenesi e nella follicologenesi. Attraverso il legame al DNA in modo sequenza-specifico, FOXL2 integra i segnali dello sviluppo con programmi trascrizionali che controllano le decisioni di destino cellulare, l’apoptosi e l’omeostasi endocrina riproduttiva. Partecipa a reti di regolazione genica che intersecano la segnalazione TGF-β/SMAD e altre vie che governano lo sviluppo gonadico. La disregolazione o le mutazioni di FOXL2 sono associate a disturbi dello sviluppo sessuale e a patologie ovariche, incluse alterazioni caratteristiche osservate nei tumori a cellule della granulosa.
FOXL2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FOXL2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FOXL2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FOXL2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FOXL2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.