FOXC1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403113-LAC

FOXC1 (forkhead box C1) kodiert einen Transkriptionsfaktor der Forkhead-Familie, der an cis-regulatorische DNA-Elemente bindet, um Genprogramme zu koordinieren, die Zellschicksal, Proliferation, Differenzierung und Migration steuern. FOXC1 ist an Entwicklungs- und Gewebehomöostase-Signalwegen beteiligt, einschließlich der Regulation der epithelial-mesenchymalen Transition sowie kontextabhängiger Interaktionen mit MAPK-, TGF-β- und WNT-assoziierten transkriptionellen Netzwerken. Eine fehlregulierte FOXC1-Expression und nachgeschaltete transkriptionelle Schaltkreise wurden in mehreren krankheitsrelevanten Kontexten mit veränderter Linienfestlegung und invasiven Phänotypen in Verbindung gebracht, was FOXC1 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung der transkriptionellen Kontrolle zellulärer Identität macht. Als nukleärer Regulator wird FOXC1 häufig hinsichtlich seiner Effekte auf chromatinassoziierte Transkriptionszustände und das Signalweg-Crosstalk untersucht, das Differenzierung und Stressantworten steuert.

FOXC1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente FOXC1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

FOXC1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der FOXC1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen FOXC1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen FOXC1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.