Plasmide Double Nickase (h) FOXC1: sc-403113-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FOXC1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FOXC1 Double Nickase (h) et le plasmide FOXC1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FOXC1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FOXC1 Antibody (4D11): sc-293455
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FOXC1 | sc-403113-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FOXC1 | sc-403113-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXC1 (forkhead box C1) est un facteur de transcription à hélice ailée (« winged-helix ») qui régule des programmes d’expression génique contrôlant le développement embryonnaire, la spécification du destin cellulaire et la mise en place de l’organisation tissulaire, avec des rôles majeurs dans la formation du segment antérieur de l’œil, la morphogenèse cranio-faciale et la biologie vasculaire. Grâce à une liaison à l’ADN spécifique de séquence, FOXC1 coordonne des réseaux transcriptionnels qui s’entrecroisent avec des voies de signalisation du développement telles que TGF-β/BMP et Wnt, orientant les décisions de lignée et le remodelage de la matrice extracellulaire. Une activité dérégulée de FOXC1 a été associée à des dysgénésies congénitales du segment antérieur, incluant des phénotypes du spectre d’Axenfeld–Rieger, et contribue à des états transcriptionnels aberrants observés dans de multiples cancers. Dans des modèles cellulaires, FOXC1 est souvent étudié pour son influence sur la transition épithélio-mésenchymateuse, des phénotypes de type « stem », et des effets dépendants du contexte sur la prolifération, la migration et les réponses au stress.
FOXC1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FOXC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FOXC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FOXC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FOXC1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.