Fluorescein 5(6)-isothiocyanate (CAS 27072-45-3)

Fluorescein-5(6)-isothiocyanat, allgemein abgekürzt als FITC, mit der CAS-Nummer 27072-45-3, ist ein Derivat von Fluorescein, einem der am häufigsten verwendeten Fluoreszenzfarbstoffe im Bereich der Biochemie und Molekularbiologie zur Markierung von Proteinen, Nukleinsäuren und anderen Biomolekülen. FITC zeichnet sich durch die kovalente Bindung einer Isothiocyanatgruppe aus, die gegenüber nukleophilen Gruppen wie Aminen reaktiv ist, die typischerweise in den Seitenketten von Lysinresten in Proteinen oder den Aminogruppen von Nukleotiden in Nukleinsäuren zu finden sind. Durch diese chemische Reaktion wird eine Thioharnstoff-Bindung gebildet, die das Biomolekül mit einem Fluorescein-Anteil versieht, der bei Anregung durch Licht bei bestimmten Wellenlängen (um 495 nm) stark fluoresziert und ein helles grünes Licht (um 519 nm) aussendet. Diese reaktive und fluoreszierende Eigenschaft von FITC hat es zu einem wertvollen Werkzeug in verschiedenen wissenschaftlichen Forschungsbereichen gemacht. Es wird vor allem in der Fluoreszenzmikroskopie, der Durchflusszytometrie und dem ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) eingesetzt, um das Vorhandensein, die Position und die Quantifizierung markierter Moleküle in komplexen biologischen Systemen sichtbar zu machen. Darüber hinaus kann FITC auch zur Verfolgung zellulärer Prozesse, zur Untersuchung von Proteininteraktionen und zur Kartierung neuronaler Verbindungen eingesetzt werden. Seine Fähigkeit, als Fluoreszenzsonde zu fungieren, hat bedeutende Fortschritte beim Verständnis zellulärer und molekularer Mechanismen sowohl unter normalen als auch unter pathologischen Bedingungen ermöglicht. Die helle und stabile Fluoreszenz von FITC ermöglicht auch die Erstellung von mehrfarbigen Färbeprotokollen durch die Kombination mit anderen Fluoreszenzfarbstoffen, wodurch die Auflösung und Tiefe von Bildgebungsstudien in der biowissenschaftlichen Forschung verbessert wird.